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产品系列

纯度 活性单位 价格(元)
蛋白酶K 100mg ≥99% ~35 U/mg 300
蛋白酶K 500mg ≥99% ~35 U/mg 1,200
蛋白酶K 1000mg ≥99% ~35 U/mg 2,000

使用说明和检验报告

产品简介


蛋白酶K是现有蛋白酶中活性最高的品种,来源于林伯氏白色念球菌(Tritirachium album limber)的蛋白酶K基因。我公司的蛋白酶K产品是由重组酵母表达的基因重组蛋白质,在酶分子结构设计上,参考国内外文献,做了六个定点突变,理论上可以提高酶活性50倍。蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。在pH 4到pH 12的条件下均有活性,在SDS、尿素或EDTA存在时亦很稳定。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键,用于生物样品中蛋白质的降解。此酶经脱色和色谱纯化去除了RNA和DNA,也检测不到其它杂酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定,还具有降解天然蛋白质的能力,因而它应用很广泛,主要用在基因诊断试剂盒、基因组DNA提取试剂盒、RNA提取试剂盒中去除DNA和RNA制备中的核酸酶,也可以用于提取组织中非蛋白成份降解含有蛋白质的杂质,比如DNA疫苗和肝素的制备等。


货号: PTK-100
规格: 每个独立包装中含有100毫克的蛋白酶K(或者客户包装)
比活性值: 40.5 U/mg蛋白,含有50%冻干保护剂。
来源种属: 林伯氏白色念球菌(Tritirachium album limber
分子质量: 29,730

贮存和使用

干粉状态可在0~4oC条件下低温保藏。溶解后分装为适当体积,-20oC贮存。运输可在室温下进行。?
正确的贮存条件下,干粉状态的有效期可达一年。液体状态在-20oC有效期为半年。打开包装使用后,如果在2~8oC环境下放置超过一周时间,建议过滤除菌或增加稳定剂如0.5%叠氮化钠,防止微生物污染。

贮存和稀释缓冲液:

50 mM Tris-HCL缓冲液,2mM CaCL2 (pH 8.0)。


质量控制

活性单位定义 37oC、pH 7.5条件下,每分钟可水解底物酪蛋白生成1 μmol酪氨酸的蛋白酶K 的量,定义为一个单位(U)。
脱氧核糖核酸酶残留 以λ DNA为底物,37oC消化6小时以上,未检测到脱氧核糖核酸酶活性。
核糖核酸酶残留 25oC消化16小时以上,未检测到核糖核酸酶活性。


参考文献

1. Kraus, E; et.al. Proteinase K from the MoldTritirachium album limber, Specificity and Mode of Action. Z. Physiol. Chem., 357:939; 1976.
2. Jany,KD, et al. Amino Acid Sequence of Proteinase K from the Mold,?Tritirachium album limber.Proteinase K; a Subtilisin-related Enzyme with Disulfide Bonds. FEBS Letter, 199,139.1986.

酶活测定和稳定性试验


(1) 酶活测定 Sigma-Aldrich 方法:


(2)纯度和消化蛋白测试(SDS-PAGE)

结果: 蛋白质纯度超过 99% (激光扫描 SDS-PAGE胶)

(3)稳定性测试(一年数据)

结论:冻干粉正确储存一年内活性不变;液体酶酶活半年内降低小于5%。